Калуга
Kaluga
Игорь Владимирович Терехов
Калуга
Igor V. Terekhov
Kaluga
Санкт-Петербург
Saint-Petersburg
Саратов
Saratov
Орел
Orel
Цель исследования — изучение взаимосвязи содержания в мононуклеарных лейкоцитах цельной крови при пневмонии и у практически здоровых лиц супресcора цитокиновой сигнализации 2 (SOCS2) с продукцией цитокинов (ФНОα, TGFb, ИФНα, ИФНβ, ИФНγ, ИЛ-1β, ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-10, ИЛ-12, ИЛ-17А, РАИЛ-1, RANTES) и отдельными факторами NF-kB и JAK/STAT-сигнальных путей (NF-kB2, p65, p50, STAT1, STAT3, STAT5B, STAT6). Материалы и методы исследования. Материалом исследования служили мононуклеарные клетки, выделяемые из образцов венозной крови, а также плазма крови практически здоровых лиц и больных пневмонией. В ядерно-цитоплазматических лизатах мононуклеарных клеток крови методом иммуноферментного анализа оценивали концентрацию компонентов ядерного фактора транскрипции NF-κB: р65, р50, NF-κB2, факторов STAT1, STAT3, STAT5B, STAT6, протеина SOCS2. Также определяли концентрацию ФНОα, ИЛ-1β, TGFb, ИФНα, ИФНβ, ИФНγ, ИЛ-1β, ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-10, ИЛ-17А, РАИЛ-1, RANTES. Результаты проведенного исследования свидетельствует о том, что стадия реконвалесценции пневмонии сопровождается дисрегуляцией продукции основных провоспалительных цитокинов, проявляющейся снижением уровня ФНОα, TGFb, RANTES, ИЛ-4, ИЛ-17А, ИФНβ, ИФНγ и повышением продукции ИЛ-2 и ИФНα. На этом фоне отмечено снижение фосфорилирования факторов STAT3 и STAT4, а также снижение содержания в МНК протеинов р50 и р65. Указанные изменения ассоциировались с повышенным содержанием в МНК фактора SOCS2. Проведенный анализ показал, что повышение содержания в МНК SOCS2 от минимального уровня, определяющегося концентрацией, соответствующей 1 квартилю выборки (1,3 нг/мл) до максимального, определяющегося 4-м квартилем выборки (1,7 нг/мл) ассоциировано со снижением продукции ИЛ-1β, ИЛ-4, ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-10, ИЛ-17А, TGFb, RANTES и ИФНβ на фоне повышения уровня ИНФα, ИНФγ и ИЛ-2. Изменения продукции цитокинов сопровождались повышением содержания STAT5B, STAT4 и NF-kB2 и снижением фосфорилирования STAT3. уменьшением содержания в клетке компонентов ядерного фактора транскрипции NF-κB, в частности, p50, p65. Заключение. Особенности взаимосвязей SOCS2 с исследуемыми факторами позволяет говорить о том, что его высокий уровень способствует ограничению продукции провоспалительных цитокинов, в особенности, продуцирующихся Т-хелперами 2 типа и Th17, стимулирует усиление чувствительности ИКК к ИЛ-2 и стимуляции Т-хелперов 1 типа. Указанные эффекты реализуются за счет повышения фосфорилирования факторов STAT5 и STAT4, снижения активности STAT3, изменения соотношения в клетке компонентов р50, р65 и NF-κB2 ядерного фактора транскрипции NF-κB.
The aim of the investigation was to study the relationship between the content of whole blood in mononuclear leukocytes in pneumonia and in apparently healthy individuals of cytokine signaling suppressor 2 (SOCS2) with the production of cytokines (TNFα, TGFb, IFNα, IFNβ, IFNγ, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-5, IL-10, IL-12, IL-17A, RAIL-1, RANTES) and individual factors of the NF-kB and JAK / STAT signaling pathways (NF-kB2, p65, p50, STAT1, STAT3, STAT5B, STAT6). Materials and research methods. The research material was mononuclear cells isolated from venous blood samples, as well as blood plasma of practically healthy individuals and patients with pneumonia. In nuclear-cytoplasmic lysates of mononuclear blood cells, the concentration of the components of the nuclear transcription factor NF-κB, p65, p50, NF-κB2, factors STAT1, STAT3, STAT5B, STAT6, and protein SOCS2, was assessed by enzyme immunoassay. We also determined the concentration of TNFα, IL-1β, TGFb, IFNα, IFNβ, IFNγ, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-5, IL-10, IL-17A, RAIL-1, RANTES. The results of this study indicate that the stage of pneumonia convalescence is accompanied by dysregulation of the production of the main proinflammatory cytokines, manifested by a decrease in the level of TNFα, TGFb, RANTES, IL-4, IL-17A, IFNβ, IFNγ and an increase in the production of IL-2 and IFNα. Against this background, a decrease in the phosphorylation of the STAT3 and STAT4 factors was noted, as well as a decrease in the content of p50 and p65 proteins in MNCs. These changes were associated with an increased content of the SOCS2 factor in MNCs. The analysis showed that an increase in the content of SOCS2 in MNCs from the minimum level determined by the concentration corresponding to the 1st quartile of the sample (1.3 ng / ml) to the maximum, determined by the 4th quartile of the sample (1.7 ng / ml) is associated with a decrease in production IL-1β, IL-4, IL-4, IL-5, IL-10, IL-17A, TGFb, RANTES and IFNβ against the background of an increase in the level of INFα, INFγ and IL-2. Changes in cytokine production were accompanied by an increase in STAT5B, STAT4, and NF-kB2 levels and a decrease in STAT3 phosphorylation. a decrease in the content in the cell of the components of the nuclear transcription factor NF-κB, in particular, p50, p65. Conclusion. The peculiarities of the relationship of SOCS2 with the studied factors suggests that its high level helps to limit the production of proinflammatory cytokines, in particular those produced by type 2 T-helpers and Th17, stimulates an increase in ICC sensitivity to IL-2 and stimulation of type 1 T-helpers. These effects are realized due to an increase in the phosphorylation of the STAT5 and STAT4 factors, a decrease in the STAT3 activity, and a change in the ratio of the components p50, p65 and NF-κB2 of the nuclear transcription factor NF-κB in the cell.
The authors declare that there are no conflicts of interest present.