Оценка трансплантации мезенхимальных стволовых клеток из костного мозга у пациентов с циррозом печени, вызванным вирусом гепатита с (пилотное исследование)

Введение. Цирроз печени является конечной стадией прогрессирования хронических диффузных заболеваний печени. Поздние стадии цирроза печени, как правило, не поддаются консервативному лечению, и единственным эффективным методом помощи пациентам на данной стадии является трансплантация печени. Однако широкое применение последней в клинической практике сопряжено с серьезными препятствиями: нехваткой донорских органов, отторжением трансплантата, осложнениями в ходе операции и послеоперационном периоде, а также высокой стоимостью такого вмешательства. Трансплантация стволовых клеток костного мозга, особенно трансплантация мезенхимальных стволовых клеток, может быть потенциальным средством лечения цирроза печени и применяться после проведения дополнительных клинических исследований по эффективности и безопасности.

Цель исследования — оценить эффективность и безопасность интрапаренхимальной трансплантации аутологичных мезенхимальных стволовых клеток из костного мозга для лечения пациентов с циррозом печени, вызванным вирусом гепатита С (ВГС).

Материалы и методы. Проведено пилотное открытое нерандомизированное проспектив ное исследование с включением 6 пациентов с циррозом печени, вызванным вирусом гепатита С. Аутологичные мезенхимальные стволовые клетки трансплантировали внутрипаренхимально в ткань печени из расчета 1×106/кг массы тела — по 1 мл в 5 точек.

Результаты. К 6 мес. после трансплантации наблюдалось снижение уровня билирубина (с 36,4 мкмоль/л до 27 мкмоль/л, р=0,03), баллов по показателю MELD (с 11,5 до 8, р=0,035), повышение уровней тромбоцитов к 3 мес. (с 83×109/л до 124,6×109/л, р=0,031) и 6 мес. (до 119,5×109/л, р=0,031). Не было отмечено влияния к 6 мес. после трансплантации на баллы по шкале Чайлд-Пью (р=0,181), показатели цитолиза (сохранение повышенных уровней аланинаминотрансферазы (р=0,062) и аспартатаминотрансферазы (р=0,844)), репликативную активность вируса (сохранение РНК ВГС в крови) (р=0,219). Введение мезенхимальных стволовых клеток к 6 мес. после трансплантации не приводило к разрешению цирроза печени и воспалительной инфильтрации по данным световой микроскопии, а также к разрешению капилляризации синусоидов (р=0,586) и трансдифференцировки звездчатых клеток Ито в миофибробласты (р >0,99) по данным иммуногистохимического исследования. Ни у кого из пациентов после проведения трансплантации не было отмечено повышения температуры тела, увеличения лабораторных показателей, изменений со стороны жизненно важных функций. У одного пациента при госпитализации через 6 мес. после трансплантации мезенхимальных стволовых клеток был диагностирован тромбоз глубоких вен правой голени.

Выводы. Отмечено положительное влияние мезенхимальных стволовых клеток на улучшение функции печени, при отсутствии их влияния на репликативную активность вируса и сохраняющуюся активность воспалительного процесса. Использованная методика трансплантации мезенхимальных стволовых клеток является безопасной процедурой для пациентов с циррозом печени, вызванным вирусом гепатита С классов тяжести А и В и может быть применена в клинической практике.

1. Woodbury D, Schwarz E.J., Prockop D.J. et al. Adult rat and human bone marrow stromal cells differentiate into neurons. J Neurosci Res. 2000; 61(4): 364-370. doi: 10.1002/1097-4547 (20000815)61: 4 <364 : AID-JNR2> 3.0.CO; 2-C.

2. Lee K-D, Kuo T. K-C, Whang-Peng J. et al. In vitro hepatic differentiation of human mesenchymal stem cells. Hepatology. 2004; 40(6): 1275-1284. doi: 10.1002/hep.20469.

3. Sato Y., Araki H., Kato J. et al. Human mesenchymal stem cells xenografted directly to rat liver are differentiated into human hepatocytes without fusion. Blood. 2005; 106(2): 756-763. doi: 10.1182/blood-2005-02-0572.

4. Baharvand H., Hashemi S.M., Ashtiani S.K. et al. Differentiation of human embryonic stem cells into hepatocytes in 2D and 3D culture systems in vitro. Int J Dev Biol. 2006; 50(7): 645-652. doi: 10.1387/ijdb.052072hb.

5. Takatsugu T., Yoshikawa M., Kanda S. et al. In vitro differentiation of embryonic stem cells into hepatocyte-like cells identified by cellular uptake of indocyanine green . Stem Cells. 2002; 20(2): 146-154. doi: 10.1634/stemcells.20-2-146.

6. Körbling M., Katz R.L., Khanna A. et al. Hepatocytes and epithelial cells of donor origin in recipients of peripheral-blood stem cells. N Engl J Med. 2002; 346(10): 738-746. doi: 10.1056/NEJMoa3461002.

7. Theise N.D., Nimmakayalu M., Gardner R. et al. Liver from bone marrow in humans. Hepatology. 2000; 32(1): 11-16. doi: 10.1053/jhep.2000.9124.

8. Zhao D-C., Lei J-X, Chen R. et al. Bone marrow-derived mesenchymal stem cells protect against experimental liver fibrosis in rats. World J Gastroenterol. 2005; 11(22): 3431-3440. doi: 10.3748/wjg.v11.i22.3431.

9. Sakaida I., Terai S., Yamamoto N. et al. Transplantation of bone marrow cells reduces CCl4-induced liver fibrosis in mice. Hepatology. 2004; 40(6): 1304-1311. DOI: 10.1002 / hep.20452.

10. Лазебник Л.Б., Голованова Е.В., Слупская В.А. и др. Мезенхимальные стволовые клетки в лечении хронических заболеваний печени — от эксперимента к клинической практике. Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. 2012; 6: 13–18.

11. Esmaeilzadeh A., Ommati H., Kooshyar M.M. et al. Autologous Bone Marrow Stem Cell Transplantation in Liver Cirrhosis after Correcting Nutritional Anomalies, A Controlled Clinical Study. Cell J. 2019; 21(3): 268–272. doi: 10.22074/cellj.2019.6108.

12. Woodbury D., Schwarz E.J., Prockop D.J. et al. Adult rat and human bone marrow stromal cells differentiate into neurons. J Neurosci Res. 2000; 61(4): 364-370. doi: 10.1002/1097-4547(20000815)61:4<364::AIDJNR2>3.0.CO;2-C.

13. Kotkas I.E., Enukashvili N., Asadulayev Sh.M. et al. Autologous mesenchymal stem cells in treatment of liver cirrhosis: evaluation of effectiveness and visualization method. Science and Innovations in Medicine. 2020; 5(3): 197-203. doi:10.35693/2500-1388-2020-5-3-197-203.

14. Pugh R.N., Murray-Lyon I.M., Dawson J.L. et al. Transection of the oesophagus for bleeding oesophageal varices. Br J Surg. 1973; 60: 646. PubMed ID: 4541913

15. Child CG, Turcotte JG. The Liver and Portal Hypertension. Philadelphia, WB Saunders Co. 1964. NLMN ID: 46218.

16. Trey C, Burns DG, Saunders SJ. Treatment of hepatic coma by exchange blood transfusion. NEJM. 1966; 274: 473. PubMed ID: 5904286.

17. Ивашкин В.Т., Маевская М.В., Павлов Ч.С. и др. Клинические рекомендации Российского общества по изучению печени и Российской гастроэнтерологической ассоциации по лечению осложнений цирроза печени. Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 2018; 26(4): 71-102. doi.org/10.22416/1382-4376-2016-26-4-71-102.

18. Способ экспансии мезенхимальных стволовых клеток: пат. 11560 Респ. Беларусь от 10.27.2008 /Я.И. Исайкина, О.В. Алейникова: заявитель Респ. науч.-практ. центр детской онкологии и гематологии. — № а20070657; заяв. 31.05.2007; опубл. 25.02.2009// Афiцыйны бюл. / Нац. цэнтр iнтэлектуал. уласнасцi. 2009; 1: 93.

19. Patrick S. Kamath P.S., Kim W.R. The model for end stage liver disease (MELD). Hepatology. 2007; 45(3): 797-805. doi: 10.1002/hep.21563.

20. The R Project for Statistical Computing. R version 3.6.3. 2020. [Electronic resource] URL:https://www.r-project.org/. (date of the application: 09.12.2020).

21. Shi M., Zhang Z., Xu R. et al. Human Mesenchymal Stem Cell Transfusion Is Safe and Improves Liver Function in Acute-on-Chronic Liver Failure Patients. Stem cells translational medicine. 2012; 1: 725–731. doi:10.5966/sctm.2012-0034.

22. Лукашик С.П., Аленикова О.В., Цыркунов В.М., Исайкина Я.И., Кравчук Р.И. МОНИТОРИНГ МОРФОЛОГИЧЕСКИХ ЭФФЕК- ТОВ АУТОЛОГИЧНЫХ МЕЗЕНХИМАЛЬНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕ- ТОК, ТРАНСПЛАНТИРОВАННЫХ В ПЕЧЕНЬ ПРИ ВИРУСНОМ ЦИРРОЗЕ (клиническое наблюдение). Архивъ внутренней медицины. 2018; 8(2): 150-160. https://doi.org/10.20514/2226-6704-2018-8-2 150-160